摘要 ：采用国际通用的高架十字迷宫焦虑动物模型(EPM)，从行为学角度观察了四个不同给药剂 量酸枣仁汤对EPM大鼠的抗焦虑作用 。 结果显示 ，酸枣仁汤确有抗焦虑作用 ，但此效应不随给药剂量的增加而增强， 与一般化学**所遵循的量效关系规律不同 。
关键词 ：酸枣仁汤 ；EPM ；行为学 ；量效关系

      型号：XR-XG201-M

酸枣仁汤是临床**肝血不足 、虚热内扰之“虚劳虚烦不得眠”的有名古 方 ，有关本方药理实验方面的研究目前多局限于**催眠作用的初步观察。针对本方临床可用于**焦虚症的经验事实，本文采用国际上通用的焦虑动物模 型—(EPM ，高架十字迷宫模型)，从行为学角度观察了酸枣仁汤的抗焦虑作 用 ，并对其量效关系特点进行了初步总结。
1 材 料
1．1 动物健康雄性Wistar 大鼠90只，级别 SPF／VA F ，体重180±10g，许可 证号 ：SCXK (京 )2002．0003，北京维通利华实验动物中心提供 。所有动物提前一周购入，本实验室常规饲养。
1．2 药 物
1．2．1 酸枣仁汤 (SZR T) ：由酸枣仁18g、知母10g、茯苓 10g、川芎 5g、甘草3g 组成 (参考高等中医院校五版《方剂学》教材) ，全部药材购自北京 同仁堂有限公司 。 常规方法煎煮后经水提制成150％浓度 ，分装**后4 摄氏度保存备用。
1．2 ．2 D ZP (D ia z epam Tablets，***片 ) ：京卫药准字(1996) 第 154011号 ，北京益民制药厂出品 。 ***36 片 ，研钵粉碎后以双蒸水溶 解 ，加入2 ％羧甲基纤维素钠1～2 滴充分混匀 ，配成10％浓度 。 4 摄氏度保存 ，使用前混摇均匀 。
1．3 行为学测试仪器大鼠高架十字迷宫(EPM ) ：采用国际通用方法制作。由两个相对的开放臂(open aim ，长X 宽分别为50cm X 10cm ) 、两个相对的封闭臂 (enclosed arm ，clos e aITI1，长 X 宽 ×高 分 别 为50cm ×10cm ×40cm ) 、一个连接四只臂的中央平台(central platform ， 10cm ×10cm ) (即 ：开放臂一中央平台一开放臂或封闭臂一 中央平台一 封闭臂 ，此二者互 相垂直成为“十”(plus) 形状 )和围绕在开放臂边缘的1cm高的矮挡板组成 (目的是防止动物在探究过程中不慎滑下迷宫) 。 本迷宫由国产有机玻璃制 作(8mm厚，上海尊龙凯时人生就是博信息科技有限公司提供) . 有机玻璃部分整体固定于(由黑色等长宽 的“十”木架和不锈钢可升降底座组成的)支架上，使迷宫底板调节到距实验室 地面50cm处 。
2 方 法
2 ．1 动 物 处 置 及 分组 大 鼠每 笼 7 ～8 只 ，不 限食水 。 光 照 节 律 12L ：12D (6：00 ～18：00 ) ，室 温 (18 ±2 ) ℃ ，保 持 安 静 。 将 大 鼠随 机 分 为 空 白对 照 、D ZP 、SZRT I 、 II 、 m 、 IV 共 6 组 ，每 组 15 只。 其 中 中 药I 、 Ⅱ、 Ⅲ、 Ⅳ组 分 别 按 3．75g／ kg／ d、7．5g／ kg／ d、 15g／kg／ d 、30g／ kg／ d 给 予 SZR T 灌 胃 ，DZP 组 给 予 1mg／ kg灌 胃 ，空 白对 照 组 灌 服 等容 积 的生 理 盐 水 。 各组 连续给 药 10d，于 第 10d 在 末 次 给 药 2h 后 8：o0 ～14 ：00A m 做行 为测 试 。 所有 动物 均 提前 2h 进 入 测 试 实验室 。
2 ．2 行 为学测 试
2 ．2 ．1 测 试 条 件 实 验 室 内光 线 昏暗 (以 1．5m 距离处 能 区分 大 鼠细 微 活 动 的 * 低亮 度 为 准 ) 并 保 持恒亮 ，室温 20~C 左 右 ，保 持 安 静 。 测 试 箱 放 置 于 实验室 一 角 ，周 围布 以 2m 高 黑色单 调 背景 。 实 验过 程中有 一名人 员 搬 运 动 物 ，2 名 事 先 经 过 实 验 记 录 培训但 不 熟 悉 分组 情 况 的人 员在 距 离 测试 箱 1．5m 处分别 观察 记 录动 物 的活动 。
2 ．2 ．2 测试 指 标 迷 宫 测 试 前 将 每 只 大 鼠 放 入 一个 60cm ×60cm ×35cm 塑 料盒 中，任 其 自由探 究 5min后迅 速 置于 EPM 的中 央平 台处 ，使 其 头 部 正对 其 中 一 个 开放 臂 ，释放 后 即开始 记 录下述 指标 ：①进 入 开放 臂次数 (open arln entry ， OE ) ：进 入到任一 开放 臂 的次 数 ，以 大 鼠 四个 爪 子 均 进 入 到 臂 内为 准 ，中途 一个 爪 子 从 该 臂 中 完全 退 出则 为 该 次 进入活 动 完 成 ； ② 进 入 开 放 臂 时 间 (open arln tim e，OT) ：进 入 开放臂 的 时间 ，单 位 ：秒 ； ③ 进 入封 闭 臂 次数 (cl0se ariB entr y ， CE ) ：进 入 到任 一 封 闭臂 的 次数 ，以大 鼠 四个 爪子 均进 入 到 臂 内 为准 ； ④ 进 入 封 闭臂时间 (cl0se arln time， CT ) ：进 入封 闭臂 的时 间 ，单 位 ：秒 ； ⑤ 向下 探 究 次 数 (head— dipping) ：大 鼠置 身 于 中央平 台或 开放 臂 时 ，一 边 用 前 爪 握 住 迷 宫边 缘 一 边把头部 和肩部 伸 出开放 臂 的边缘 向迷宫 下 面探 究 的行 为次数 ； ⑥ 封 闭臂 后腿 直 立 次数 (rearing) ：大 鼠在封 闭臂 前腿 抬起 以后 腿支 持使 身体 竖立 的次数 。由① ～④分 别 计 算 出 ：① 进 入 开放 臂 和封 闭 臂的总次 数 (OE + CE ) ：表示 大 鼠的运 动 活力 (1ocom otoractivitv) ：②进 入 开放 臂 次 数 比例 (OE ％ ) ： 即 开放 臂进 入次 数／ (OE + CE ) ×100 ％ ；③ 开放 臂 停 留 时 间 比例 (O T％) ，即开放 臂 停 留时间／ (OT 十 CT ) ×100 ％。每 只大 鼠测试 5m in。 中 间用 湿 布 擦 拭 迷 宫 ，**粪 便 ，继用 干布擦 净 后再进 行下 一 只大 鼠的测试 。
2 ．3 数据 的统 计处 理 所得 数据 均用 SPSS l1．0 forwindow s软 件 统 计 处 理 ，采 用 单 因素 方 差 分 析 (one—w ay A N O V A ) 进行 检验 。

4 讨 论
酸枣仁汤 (SZR T) 现代临床除****症外 ，还用于以情绪或神志障碍为主要表现的精神神经系统**。焦虑症是一种以广泛和持续焦虑或反复发作的惊恐不安为主要特征的神经症 ，常伴以头晕、胸闷、心悸等植物神经功能症状和运动性紧张 ，一般属于中医“ 心神不宁”的范 畴 ，临证可从调神角度辨治 。SZRT 具有养心** 、清热除烦功效，与目前中医**焦虑症的基本治法相吻合 ，其在精 神**方面 的临床有效运用也提示本方可能具有潜在的抗焦虑效用。
本研究引入的高架十字迷宫模型 ，为抗焦虑研究中公认的非条件反射模型。 它利用动物对新异环境的探究特性相对高悬敞开臂的恐惧心理，形成动物的矛 盾行为 ，实验指标以进入开放臂的百分数(O E ％) 和在开放臂停留时间的百 分数 (O T％ )反映动物的焦虑状态 ，焦虑动物的 O E ％和 OT ％明 显 降低 ，经典抗焦虑**则使两者升高；开放臂和中央平台区head—dipping 次数则反映了在非保护区内的探索行为 ，代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避，与焦虑程度有一定相关性；开放臂和封闭臂总进入次数反映动物总的运动能力 ，封闭臂 rearing值也 可用来观察**有无**作用及**强度 ，但多年来关于抗焦虑药究竟如何影响这两个指标一直存在争议 。
本实验观察到： SZRT 7．5g／kg 可显著增加EPM大鼠OE％和OT％值 ，明显 提 高大 鼠在 开 放 臂 和 中央平 台 区 head— dipping次数及封闭臂的 rearing值 ；15g／kg SZRT 可增加EPM大鼠 OE ％和 head— dipping次数 ，但对OT ％影响不明显 ； 与空白对照组比较 ，SZ R T 3 ．75g／kg 、30g／ kg对 O E ％ 、 O T ％ 、head．dipping和 rearing 影响均不明 显 。 实验结果表明 ： SZRT 在7 ．5g／ kg ～15g／ kg 剂量范围内 ，具 有一定的抗焦虑效应 ，与DZP的作用方向一致 ，从对EPM大鼠各项指标影响 结果看 ， 以7．5g／kg 剂量效果*优 ，而在3 ．75／kg及 3Og／kg 剂量 时SZRT几乎不表现抗焦虑效用 。
本研究证 实 ：中药酸枣仁汤确有抗焦虑作用 ．从小剂量开始此效用逐渐增 强，但达到一定剂量后 ，抗焦虑效应并不再伴随剂量的增加而增强 ，这与一 般化学**所遵循的量效关系规律不同，其发生机制尚有待进一步研究 。