摘要:[目的]研究“醒脑开窍”针法和“调补气血”针法对SAMP10行为学异常改变的影响。[方法]采用自然快速老化脑萎缩及痴呆模型小鼠SAMP10,于实验前后各进行1次穿梭箱实验,并记录小鼠遭受电击次数、电击时间及主动反应时间。[结果]实验前,6月龄P10与R1相比,各行为学指标均有显著性差异(P<0.01);P10各组之间无显著性差异(P> 0.05);实验后,醒脑组、补气血组各项指标与P10对照组比较,均有明显改善(P< 0.05,或P< 0.01),与R1比较,均有显著性差异(P< 0.01),而两种针法间比较,无显著差异(P> 0.05)。[结论]P10较同月龄R1学习记忆能力显著下降,是理想的脑萎缩及痴呆动物模型。“醒脑开窍”针法和“调补气血”针法可部分改善SAMP10的学习记忆能力。

关键词:快速老化脑萎缩及痴呆模型小鼠(SAMP10);行为学;“醒脑开窍”针法;“调补气血”针法

早老性痴呆(AD)是伴随老化而出现的以进行性痴呆为主的大脑变性**,主要临床表现为记忆力丧失、智力减退和行为人格退化,至今仍缺乏有效的防治措施。本项研究采用的动物模型是从日本引进的国际公认的自然快速老化模型小鼠SAM

(Senecence Accelerate Mouse),其中SAMP10品系小鼠以学习记忆障碍、脑萎缩为特征;SAMR1随增龄正常匀速老化,通常作为P品系的正常对照。“醒脑开窍”针法是有名针灸专家石学敏院士创立的**老年期痴呆的临床验方,立足于调神。“调补气血”针法是导师韩景献教授根据虚是老年期痴呆的病理基础而确立的针法,从治病求本入手,补其正虚,祛其邪瘀,立足于补虚。

1材料与方法

1.1动物选择及分组选择本院繁殖饲养的6月龄SAMP10雄性小白鼠30只,随机分为醒脑开窍针刺组、调补气血针刺组、捉抓空白组,每组10只;另外选择6月龄SAMP1正常老化雄性小白鼠10只,作为正常老化对照组。

1.2穴位选择及针刺方法参照中国针灸学会实验针灸研究会制定的“动物针灸穴位图谱”,醒脑组选取人中穴、双侧内关穴,人中穴行雀啄泻法强刺激10次,内关穴用捻转泻法20 s;补气血组选取膻中、中脘、气海及双侧血海,均行捻转补法各10 s。上述针法均不留针,其他各组则进行与针刺组相同程度的捉抓,每次持续40 s。

1.3实验内容穿梭箱实验:采用上海尊龙凯时人生就是博信息科技有限公司研制的XR-XC105型小鼠穿梭实验系统。在安静环境中,每天8∶ 00—12∶00进行,室温(25±1)℃。测试前先将小鼠置于测试箱中自由活动5 min,以消除其探究反射。程序设置为:蜂鸣5 s,继之电刺激15 s,间隔15 s,而后重复上述程序,如此循环20次。电脑将自动记录非条件反射次数(即电击次数)、遭受电击时间及主动反应时间等参数,

以评价小鼠的学习记忆能力。

1.4实验步骤实验前,各组小鼠依次做穿梭箱实验,所得结果为实验前数据。然后醒脑组及补气血组开始针刺, SAMP10及R1对照组则进行与针刺组(醒脑组和补气血组)相同程度的捉抓, 1次/ d,共持续2周。2周后再进行1次穿梭箱实验,所得结果即为实验后数据。全部实验数据均应用方差分析和t检验进行统计学处理(应用SPSS 8.0统计软件)。

2实验结果

本实验观察到与正常老化的SAMP1及SAMP10针刺组相比,SAMP10对照组表现为明显的行动迟缓,活动量减少,对周围环境的改变和刺激反应迟钝,皮毛无光泽,脱毛,部分小鼠出现皮肤溃疡及脊柱弯曲等。各组小鼠穿梭箱实验电击次数、电击时间及主动反应时间明显不同。数据结果详见表1。

以上结果提示: 1)实验前, 6月龄SAMP10与同月龄正常老化的SAMP1相比,各项指标均有显著性差异(P< 0.01),说明P10学习记忆能力低于正常对照组R1;而6月龄P10各组之间各项行为学指标无明显差异(P> 0.05),说明处于同一水平。2)实验后,醒脑组、补气血组各行为学指标与同品系对照组比较,均有明显改善(P<0.05,或P<0.01),但未达到正常老化的R1水平,说明两种针法可部分改善SAMP10学习记忆能力下降的状况,而两种针法间比较,无显著差异(P> 0.05)。3)实验前后,

各组自身进行对照比较,均未出现显著性差异(P10对照组电击时间、电击次数有增高趋势,主动反应时间有减少趋势。针刺组则与之相反)。

3讨论

行为学实验是专门研究动物行为变化的常用实验方法,通常用于观察和研究神经、精神及心理等方面的异常变化或表现,在基础研究中具有十分重要的意义,也是判断痴呆的基本方法之一。穿梭箱实验是定量测试动物行为学改变的重要手段。SAMP10在全身迅速老化的同时,脑老化所致的脑机能衰退表现尤为明显,表现为学习记忆困难,低恐怖不安状态等智能障碍。本课题观察了“醒脑开窍”针法和“调补气血”针法对SAMP10行为学异常改变的影响。实验结果表明,实验后,6月龄SAMP10针刺组的电击次数、电击时间均明显少于同品系的P10对照组(P< 0.05,P< 0.01),而主动反应时间则明显长于同品系P10对照组(P< 0.05);醒脑组与补气血组之间,则无显著性差异。说明上述两种针法均能不同程度的改善

SAMP10小鼠的学习、记忆能力。从P10针刺组实验前后自身对照来看,各项指标未出现明显变化,且P10针刺组与R1相比,实验后各项指标仍存在显著性差异,说明针刺只能部分改善SAMP10小鼠学习、记忆能力。