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(八臂迷宫实验)慢性癫痫对大鼠空间记忆再生能力的影响

 

八臂迷宫实验)慢性癫痫对大鼠空间记忆再生能力的影响

摘 要] 目的探讨慢性癫痫对大鼠空间记忆再生能力的影响检测组胺前体物质组氨酸和胆碱酯酶抑制剂TA K2147 对癫痫诱发记忆障碍的作用。方法大鼠在放射状八臂(四臂放食物迷宫训练成功后隔日腹腔注射亚惊厥剂量(35mgök g) 的戊四唑直至完全点燃。完全点燃后在同一迷宫中测记忆的再现过程。结果完全点燃后第1 d 至第18 d, 大鼠在放射状迷宫中的错误次数较对照组明显上升且维持在一相对平衡的状态, 31 d 后与对照组一致。TA K2147 剂量依赖性地改善了癫痫诱发的空间记忆再现障碍包括参考记忆和工作记忆。组氨酸剂量依赖性地改善参考记忆不影响工作记忆。结论戊四唑点燃癫痫可导致大鼠空间记忆再生能力下降可能与癫痫造成的胆碱能神经和组胺能神经活性降低有关。

1 材料和方法

11 动物和分组 SD 大鼠50 雄性体重220~ 300 g (浙江大学医学院实验动物中心提) , 清洁级Ê 证书号: 2229601018。将SD大鼠随机分成PTZ 点燃组(n= 40) 和对照组(n= 10) , 并分笼分组饲养自由进水每天给12h 的光照(光照时间: 800~ 2000)。在进行八臂迷宫实验前限制大鼠饮食使其体重维持在自由进食体重的80%~ 85%。行为学观察在1000~ 1700 进行。

12 迷宫训练 采用放射状八臂(四臂放食物迷宫。迷宫中央区直径30 cm , 向四周以等角度和等长度延伸八条臂(50 cm ×12 cm , 围以4. 5 cm 高的墙)。整个迷宫高出地面40 cm。训练前大鼠先在迷宫中适应2 d, 每天次。适应时只大鼠同时置于迷宫中自由活动和摄取食物10 m in。适应后进行每天次的训练。每次训练中八臂中只有四臂放置了食物(分别为35号臂) , 整个实验过程均维持此顺序。大鼠放在迷宫中央区此时中央区四周用门关住15 s 将门打开大鼠可选择进入任意一臂以摄取食物。大鼠进入有食物的臂且摄取了食物为次正确选择否则为错误选择。记录参数为错误选择的次数。重新进入放食物臂称为工作记忆错误(wo rk ing m emo ry erro r,WM E) , 进入不放食物臂称为参考记忆错误( reference m emo ry erro r, RM E)。连续次训练总错误选择次数为次或次以下认为训练成功。

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13 戊四唑点燃模型 迷宫训练成功后戊四唑点燃组大鼠腹腔注射PTZ 35 m gök g, 48 h 1非点燃组腹腔注射同样体积的生理盐水。每次注射后大鼠单独放在透明的玻璃笼子里察行为变化30 m in。癫痫发作严重程度根据文献分级: 0= 无反应; 1= 耳朵和面部抽动包括眨眼动须节奏性咀嚼; 2= 肌阵挛但无直立; 3= 肌阵挛两前肢抬起; 4= 侧身倒地; 5=背部倒地全身强直阵挛发作或死亡。若动物连续次注射PTZ 后发作级别达级或,则认为完全点燃。大鼠完全点燃后24 h 开始测记忆的再现过程整个测定过程参照物体和放食物臂同训练过程一致。

14 ** 戊四唑和组氨酸购自Sigma公司, TA K2147 由日本武田制药公司提供。所有的**均溶于生理盐水。组氨酸和TA K2147分别在记忆测试前2 h 30 m in 腹腔注射。

1 统计学处理 采用Sigm a Stat 1. 01(W indow s 95 1992, Co rp ,USA ) 统计学软件进行数据的分析处理。数据均以x表示。组间比较用ANOVA Dunnet t’s 检验。

3 讨 论

本实验发现戊四唑点燃使训练成功的大鼠在放射状八臂迷宫的错误选择次数(包括RM E WM E) 明显增多并且在完全点燃后1至18 d 内保持在一相对稳定的状态。有关癫痫大鼠学习记忆的研究电点燃模型的研究较多,用化学点燃模型者少见。与电点燃模型相比戊四唑化学点燃模型具有制作方便、成功率高、不破坏脑组织结构等优点。另外戊四唑是一种GABA受体的拮抗剂其本身对记忆无明显影响。本实验结果表明大鼠戊四唑点燃有希望成为研究癫痫诱发学习记忆障碍的模型并用于评价和筛选**癫痫诱发的认知功能障碍的**。

乙酰胆碱对学习的获得和记忆的保持都至关重要。Serra 等报道戊四唑点燃使自由活动的大鼠海马中乙酰胆碱含量下降至对照组的52% , 并维持这水平达至停止戊四唑注射30 d 恢复至对照组水平。尊龙凯时人生就是博的行为学结果与Serra 的生化结果具有时间的一致性提示慢性癫痫诱发的记忆障碍可能与脑内乙酰胆碱含量下降有关。TA K2147 是一种选择性较强的胆碱酯酶抑制剂可以活化脑内胆碱能神经。尊龙凯时人生就是博发现TA K2147 的作用可能正是在于它改善了点燃造成的海马乙酰胆碱功能的低下从而改善了戊四唑点燃诱发的大鼠空间记忆再现障碍。

综上所述大鼠戊四唑点燃造成了空间记忆再现障碍可能跟点燃造成的胆碱能神经和组胺能神经活性降低有关其具体机制还需要做进一步的探讨。尊龙凯时人生就是博的研究结果给癫痫与认知功能的关系研究和癫痫诱发记忆障碍的****评价提出了新的思路和线索。