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上海尊龙凯时人生就是博避暗实验与旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响

上海尊龙凯时人生就是博避暗实验旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响

上海尊龙凯时人生就是博避暗实验与旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响

摘 要用开场行为模型和一次性被动回避反应模型分别对经高压氧处理的老龄小鼠进行自发活动和记忆保持力检测并用荧光分光光度计测定脑内脂褐素含量探讨了高压氧(HBO)对衰老性学习记忆障碍的作用及其与脑内脂褐素含量的关系结果表明: (1)高压氧可明显增强老龄小鼠在新异环境中的自发活动显著提高其记忆保持力; (2)高压氧使老龄小鼠脑内脂褐素含量明显下降提示高压氧可改善衰老性记忆障碍其机制可能与其降低脑内脂褐素含量有关.

关键词高压氧开场行为一次性被动回避反应脂褐素

 高压氧(hyp e rba r ico xygen, HBO) 作为**脑部**的一种非创伤性方法已广泛应用于脑缺血、颅脑损伤、持续性植物状态、老年痴呆和血管性痴呆等神经系统**的**对脑功能的恢复有良好的疗效然而有关高压氧对正常生理性衰老的作用鲜见报道笔者以往的实验表明高压氧可改善衰老性记忆障碍并能降低与学习记忆相关的主要脑区(大脑皮层、海马、小脑、间脑)突触体内钙离子水平考虑到脑老化的动因较多其中脑内脂褐素积累是导致脑细胞结构受损、功能衰退的原因之一因此笔者观察了高压氧对衰老性记忆障碍和脑内脂褐素含量的影响探讨了高压氧对衰老性学习记忆行为的作用机制.

1 材料与方法

1. 1 实验动物

选 用昆明品系老龄(18月龄小鼠体重(35±3) g, 雌雄兼用由南京中医学院动物中心提供.

1. 2 高压氧处理

小鼠随机分为常压氧组(0. 10M P a)、高压氧组(0. 25M P a)和对照组试验组动物进入自制动

物加压氧舱内先用医用纯氧充分洗舱10m in, 高压氧组逐渐加压至0. 25 M P a, 高压下停留60m in, 之后以20m in匀速减至常压常压氧组则在常压(0. 10M P a)下吸纯氧60m in. 每天处理1h,2对照组小鼠常规饲养.

1. 3 行为测试

(1)开场实验,旷场实验

观察 *后一次高压氧处理后的第2天进行开场环境底面划分为许多格记录小鼠3m in内由底面中心开始跑动所穿越的格数(同时记录第1m in内的跑动格数)、后腿站立(包括扶壁站立和自由站立)次数、理毛次数和粪便粒数比较高压氧试验组与对照组小鼠在新异环境中自发行为表现的差异.

(2)一次性被动回避反应,避暗实验

 此模型用以测试小鼠的记忆保持力根据小鼠趋暗习性记录其进入暗箱前在通道上停留的时间即步入潜伏期(step2th ro ugh la tency, STL); 动物进入暗箱受到电击(0. 3mA, 50 H z, 5 s)24h再测STL. STL越长表明小鼠对电击的记忆保持越好检测时间以300s为限.

1. 4 脑组织脂褐素含量测定

行为检测后将小鼠断头取全脑加去离子水,T ef lo n玻璃匀浆器进行匀浆加入氯仿2甲醇(2∶1)溶液充分振荡, 1 500 röm in离心10m in,取下层有机相R F2540型荧光光度计测其荧光强度(发射波长435nm, 激发波长365nm), 1m göL硫酸奎宁为标准物计算每克鲜脑组织的脂褐素含量.

1. 5 统计学处理

开场行为和脂褐素含量数据的统计学处理,用组间检验一次性被动回避反应采用M ann2

W h itney非参数检验.上海尊龙凯时人生就是博避暗实验与旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响

2 结 果

2. 1 高压氧对小鼠开场行为的影响

结果如表1. 与对照组相比高压氧使老龄小鼠在开场环境中的跑动格数增多特别是在第1m in的跑动格数明显多于对照组(P< 0. 01), 后腿站立次数显著增加(P< 0. 001). 说明高压氧可提高老龄小鼠**神经系统的兴奋性使其在新异环境中的自发活动和探究行为明显增多.

2. 2 高压氧对小鼠一次性被动回避反应行为的影响

2数据表明高压氧对老龄小鼠电击前的步入潜伏期(STL)没有显著影响但却使电击后24hSTL 明显延长与对照组相比差异显著(分别为P< 0. 05P< 0. 01). 说明高压氧能明显改善老龄小鼠的记忆保持能力.上海尊龙凯时人生就是博避暗实验与旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响

3 讨 论

在动物的衰老过程中神经系统特别是大脑的结构随年龄的增长发生衰老性变化脑内脂褐素积累即是其重要的形态学指标之一脂褐素主要积累在大脑皮层和海马部位以往的研究表明,老龄小鼠学习记忆功能的减退与脑内脂褐素含量的升高有关脂褐素积累过多可破坏磷脂膜结构导致线粒体和粗面内质网减少以及空泡形成等亚细胞结构的变化并使神经元数目减少从而导致学习记忆功能的减退.高压氧可大幅度提高血中物理溶解氧量和血

氧张力提高脑细胞供氧量使有氧代谢旺盛改善脑细胞代谢及营养促进脑细胞分裂增生有利于脑损伤的修复同时高压氧使颅内动脉收缩,血管阻力增加血流量减少颅内压下降因此,高压氧**已作为脑复苏的重要急救手段之一,**的加压范围多在0. 15M P a0. 25M P a. 

本实验对老龄小鼠进行高压氧处理后发现经0. 10M P a0. 25M P a处理的老龄小鼠在新异环境中的自发活动明显增多记忆保持力均显著提高与此相对应高压氧处理后的老龄小鼠脑内脂褐素含量明显下降提示高压氧改善衰老性记忆障碍的机制可能与其降低脑内脂褐素含量有关.有研究表明动物在衰老过程中脑内脂褐素积累与体内自由基代谢发生混乱有关衰老过程中产生的大量自由基超过机体的**能力引发脂质过氧化作用的链式反应导致细胞膜损伤,同时过氧化脂质(L PO)的分解终产物(M DA)可与DN ARN A、蛋白质和磷脂等有关物质结合使膜成分改变功能障碍促进机体衰老过程脂质过氧化的代谢终产物还可引起精神行为改变,并通过交联、结合形成脂褐素引起神经系统的功能障碍而高压氧能增加体内自由基**剂——超氧化物歧化酶(SOD)的活性抑制脂质过氧化过程阻断自由基连锁反应因此推测高压氧改善老龄动物学习记忆功能的机制可能与此有关并由此抑制脑内脂褐素的积累使脑组织的损伤终止并逐渐修复从而改善脑的记忆功能.上海尊龙凯时人生就是博避暗实验与旷场实验对老龄小鼠记忆行为的影响